川芎嗪（ligustrazine）為中藥川芎的有效成分，化學(xué)結(jié)構(gòu)為四甲基吡嗪（tetramethylpyrazine， TMP），進(jìn)入機(jī)體后，能有效透過血腦屏障，廣泛分布在腦干、海馬、紋狀體、小腦和大腦皮層等部位。TMP擴(kuò)張血管的機(jī)制已有許多研究〔1〕，但對癲癇的作用及機(jī)制研究較少。本研究探討川芎嗪是否通過降低白細(xì)胞介素（IL）2、IL6和腫瘤壞死因子α（TNFα）表達(dá)水平來影響神經(jīng)系統(tǒng)的興奮性，為川芎嗪治療癲癇提供理論依據(jù)。

　　1 材料與方法

　　1.1 藥品及試劑

　　川芎嗪注射液40 mg/2 ml ，TNFα、IL2和IL6酶聯(lián)免疫檢測試劑盒（美國R&D公司生產(chǎn)）

　　1.2 動物分組及模型制備

　　采用健康雄性Wistar大鼠40只（體重200～250 g。隨機(jī)分4組，每組10只。正常對照組：腹腔注射0.9%氯化鈉注射液2 ml;癲癇模型組：4 mg/kg腹腔注射戊四氮;致癇前給予川芎嗪組：40 mg/ kg腹腔注射川芎嗪〔2〕，30 min后，4 mg/kg腹腔注射戊四氮;致癇后給予川芎嗪組：4 mg/kg腹腔注射戊四氮，45 min后，40 mg/kg腹腔注射川芎嗪。

　　1.3 行為學(xué)表現(xiàn)

　　根據(jù)Diehl〔3〕的評估標(biāo)準(zhǔn)，將大鼠的癲癇發(fā)作程度分為0～Ⅴ級。0級：無任何反應(yīng);I級：面部抽搐及咀嚼;Ⅱ級：點(diǎn)頭或甩尾;Ⅲ級：一個肢體抽動;Ⅳ級：多個肢體抽動或強(qiáng)直;Ⅴ級：前肢及全身陣攣，失去平衡，跌倒。

　　1.4 放射免疫法測定血清中TNFα、IL2和IL6的含量

　　大鼠頸靜脈取2 ml血液，離心沉淀，-20℃保存。測定前置室溫復(fù)融，混勻，4℃ 3 000 r/min離心5 min，取上清液按試劑盒說明書方法測定。

　　1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

　　所有實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均用x±s表示，采用SPSS 11.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行方差分析和t檢驗(yàn)。

　　2 結(jié)果

　　2.1 行為學(xué)觀察

　　潛伏期是從注入戊四氮開始到出現(xiàn)Ⅰ級發(fā)作時間，持續(xù)時間是指從出現(xiàn)Ⅰ級發(fā)作到不再發(fā)作的時間，見表1。在4組大鼠中，對照組無癲癇發(fā)作，癲癇組大鼠多為Ⅲ～Ⅴ級發(fā)作;致癇前給予川芎嗪組大鼠多為Ⅰ～Ⅲ級發(fā)作;致癇后給予川芎嗪組大鼠多為Ⅲ～Ⅴ級發(fā)作。表1 各組大鼠癲癇發(fā)作潛伏期和持續(xù)時間比較（略）

　　2.2 TNFα、IL2、IL6和IL8的放射免疫檢測 實(shí)驗(yàn)組血清中TNFα、IL2和IL6含量均明顯高于正常對照組（均P<0.01），見表2。表2 4組血清中TNFα、IL2和IL6的含量（略）

　　3 討論

　　目前認(rèn)為癲癇的發(fā)病過程與神經(jīng)免疫調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò)失衡密切相關(guān)。在這個調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò)中，神經(jīng)系統(tǒng)調(diào)節(jié)免疫系統(tǒng)的功能主要通過產(chǎn)生多種神經(jīng)肽和神經(jīng)遞質(zhì)，而免疫系統(tǒng)調(diào)節(jié)神經(jīng)系統(tǒng)的功能主要是通過產(chǎn)生免疫細(xì)胞因子（cytokine，CK）〔4〕。

　　NMDA（N甲基D天門冬氨酸）受體是一種興奮性神經(jīng)遞質(zhì)的主要受體，細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度升高或NMDA受體活性升高或數(shù)量增加，是神經(jīng)興奮性增高的一個重要標(biāo)志，同時也是癲癇發(fā)病的重要基礎(chǔ)〔2〕。IL2是由活化的T細(xì)胞產(chǎn)生的重要細(xì)胞因子，該因子能夠促進(jìn)大腦皮層神經(jīng)元細(xì)胞鈣內(nèi)流、升高細(xì)胞內(nèi)游離Ca2+濃度和上調(diào)神經(jīng)元NMDA受體數(shù)量，起到興奮性神經(jīng)遞質(zhì)的作用〔5〕。

　　Glu（谷氨酸）是一種中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)含量zui高的興奮性神經(jīng)遞質(zhì)。Glu作用于細(xì)胞膜上NMDA受體，使受體依賴性Ca2+通道開放，Ca2+內(nèi)流，細(xì)胞內(nèi)Ca2+增加可以激活磷脂酶，使質(zhì)膜內(nèi)的磷脂酰肌醇（PIP2）水解，產(chǎn)生胞內(nèi)第二信使甘油二酯（DAG）和三磷酸肌醇（IP3），增加胞內(nèi)Ca2+庫釋放〔6〕。TNFα與炎癥和腫瘤關(guān)系密切，由巨噬細(xì)胞和淋巴細(xì)胞分泌，是具有廣泛生物學(xué)效應(yīng)的細(xì)胞因子，可刺激星形膠質(zhì)細(xì)胞和小膠質(zhì)細(xì)胞分泌Glu，抑制星形膠質(zhì)細(xì)胞對Glu攝取，上調(diào) Glu的NMDA受體的活性，通過改變Glu含量影響癲癇發(fā)作過程。

　　IL6主要由單核巨噬細(xì)胞、T淋巴細(xì)胞分泌，也可由中樞神經(jīng)細(xì)胞產(chǎn)生，在大鼠海馬區(qū)原位雜交技術(shù)檢出IL6，提示某些中樞神經(jīng)元或者膠質(zhì)細(xì)胞具有合成IL6的能力〔7〕，但其表達(dá)水平一般較低。某些病理過程導(dǎo)致的IL6過量表達(dá)導(dǎo)致海馬和小腦部位的星形膠質(zhì)細(xì)胞明顯增生，引起海馬區(qū)腦電圖癲癇樣改變，并出現(xiàn)癲癇發(fā)作征候〔8〕。

　　本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，與癲癇組相比，致癇前給予川芎嗪的大鼠，癲癇發(fā)作潛伏期延長和持續(xù)時間縮短，差異顯著（P<0.01）;致癇前給予川芎嗪組IL2、IL6和TNFα水平明顯低于癲癇模型組，說明川芎嗪通過降低IL2、IL6和TNFα含量從而影響其對中樞神經(jīng)系統(tǒng)免疫反應(yīng)的調(diào)節(jié)，維持免疫神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)的平衡，控制癲癇發(fā)作。與癲癇組相比，致癇后給予川芎嗪大鼠，各項(xiàng)指標(biāo)無顯著差異（P>0.05），分析原因可能由于在癲癇發(fā)作45 min后才給予川芎嗪治療，時間較長，錯過了其抗癲癇作用的*時間。

　　川芎嗪臨床應(yīng)用范圍廣，無明顯副作用，價格便宜，貨源充分，作為非鎮(zhèn)靜類抗癲癇藥物的開發(fā)，具有可喜的前景，值得在今后的科研實(shí)踐中進(jìn)一步深入研究。