1971年瑞典學者Engvail和Perlmannn,荷蘭學者Van Weerman和Schuurs分別報道將免疫技術發(fā)展為檢測體液中微量物質(zhì)的固相免疫測定方法，稱為酶聯(lián)免疫吸附試驗）。其基本原理與RIA相同。先將已知的抗體或抗原結(jié)合在某種固相裁體上，并保持其免疫活性。測定時，將待檢標本和酶標抗原或抗體按不同步驟與固相載體表面吸附的抗體或抗原發(fā)生反應。用洗滌的方法分離抗原抗體復合物和游離成分。然后加入酶的作用底物催化顯色，進行定性或定量測定。zui初發(fā)展的免疫酶測定方法。是使酶與抗體或抗原結(jié)合，用以檢查組織中相應的抗原或抗體的存在。后來發(fā)展為將抗原或抗體吸附于固相載體，在載體上進行免疫酶染色，底物顯色后用肉眼或分光光度計判定結(jié)果。這種技術就是目前應用zui廣的酶聯(lián)免疫吸附試驗，俗稱ELISA （enzyme linked immunosorbant assay）。

　　*, 酶是一種有機催化劑，很少量的酶即可導致大量的催化過程，所以極為敏感。免疫酶技術就是將抗原和抗體的免疫反應和酶的催化反應相結(jié)合而建立的一種新技術。酶與抗體或抗原結(jié)合后，既不改變抗體成抗原的免疫學反應的特異性，也不影響酶本身的酶學活性，即在相應而合適的作用底物參與下，使基質(zhì)水解而呈色，或使供氫體由無色的還原型變?yōu)橛猩难趸?。這種有色產(chǎn)物可用肉眼、光學顯微鏡相電子顯微鏡觀察，也可以用分光光度計加以測定。呈色反應顯示了酶的存在，從而證明發(fā)生了相應的免疫反應。所以，這是一種特異而敏感的技術，可以在細胞或亞細胞水平上示蹤抗原或抗體的所在部位，或在微克、甚至納克水平上對其進行定量。