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關(guān)于酶點（ELISPOT）技術(shù)的相關(guān)知識
更新時間：2009-11-16 瀏覽次數(shù)：2784
酶點（ELISPOT）技術(shù)是zui近幾年發(fā)展起來應(yīng)用于抗病毒免疫和抗腫瘤免疫的一種新型測定方法。
Sanquin 提供的顆粒酶-B酶點檢測試劑盒應(yīng)用技術(shù)，靈敏度高，僅一個陽性細胞即可測到存在的顆粒酶-B。特異性強，結(jié)果重復(fù)性好。為抗病毒和抗腫瘤研究提供新型強有力的檢測工具。
酶點技術(shù)與酶標(biāo)技術(shù)比較
1、酶點技術(shù)明顯的特點是靈敏度增加
2、酶點技術(shù)僅需要1 個陽性細胞 / 孔即可,靈敏度達到1 :1,000,000的陽性準(zhǔn)確分析
3、酶標(biāo)技術(shù)需要至少要有400 細胞 / 孔才可達到有意義的檢測水平
4、能在單細胞水平上分析產(chǎn)生細胞因子的T細胞
顆粒酶-B介紹
顆粒酶是外切絲氨酸蛋白酶，來自細胞毒T淋巴細胞（CTLs）和自然殺傷細胞（NK）釋放的細胞漿顆粒。這些顆粒含有顆粒酶原及其它蛋白酶原，包括穿孔蛋白。由于CTL細胞與靶細胞結(jié)合（經(jīng)CTL受體和靶細胞表面的抗原肽-MHCⅠ類分子復(fù)合物結(jié)合），通過顆粒的胞吐過程，顆粒酶進入了靶細胞，穿孔蛋白在細胞膜聚合而進入靶細胞形成跨膜的小孔，使靶細胞膜穿孔。穿孔蛋白通過使粒酶-內(nèi)體膜穿孔釋放出粒酶。顆粒酶B激活了細胞內(nèi)caspases反應(yīng), zui后引起靶細胞的死亡. 顆粒酶A也能誘發(fā)靶細胞的凋亡。
在許多疾病中，用流式細胞術(shù)和免疫細胞可測定顆粒酶B陽性的CTL百分比。 部分顆粒酶也可 “漏”入外周血液和其它體液。 在健康者體內(nèi)也可測得顆粒酶。.這些可溶性的顆粒酶可以用ELISA測定。
PeliSPOT人顆粒酶 B 試劑盒用于重復(fù)性 特異性定量測定人CTL細胞和NK細胞分泌釋放的顆粒酶B頻數(shù)。
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