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Elisa試劑盒具體操作方法表格版發(fā)布
更新時(shí)間：2015-02-05 瀏覽次數(shù)：1629
Elisa試劑盒具體操作方法表格版發(fā)布
根據(jù)上海勁馬生物多年來Elisa試劑盒的操作經(jīng)驗(yàn)，我司特在新春佳節(jié)來臨之際，對Elisa試劑盒操作步驟建立表格版文檔，供大家詳細(xì)參考Elisa試劑盒的具體操作步驟。咨詢我司試劑產(chǎn)品，年末有特惠活動哦。
方法 步驟 | 間接法（測抗體） | 雙抗體夾心法 （測抗原） | 競爭法（測抗原） | 抑制性測定法 |
1 | 包被抗原：用包被緩沖液稀釋抗原至zui適濃度（5～20μg/ml）各0.3ml加于微反應(yīng)板每個(gè)凹孔中,4℃過夜或37℃水浴2～3小時(shí),貯存冰箱 | 包被抗體：用包被緩沖液稀釋特異性抗體球蛋白至zui適濃度（1～10μg /ml），每凹孔加0.3ml，4℃過夜，或37℃水浴3小時(shí)，貯存冰箱 | 包被特異性抗體：
同左 | 包被抗原：
同左 |
2 | 洗滌：移去包被液，凹孔用洗滌緩沖液（含0.05%吐溫-20）洗3次，每次5分鐘 | 同左 | 同左 | 同左 |
3 | 加被檢標(biāo)本：每凹孔加入用含有0.05%吐溫-20的稀釋緩沖液稀釋的被檢血清各0.2ml，37℃，作用1～2小時(shí) | 每凹孔加入0.2ml用稀釋緩沖液稀釋的含抗原的被檢標(biāo)本，37℃作用1～2小時(shí)。 | 分2組,a組加酶標(biāo)記抗原和被檢抗原混合液0.2ml，另一組只加酶標(biāo)記抗原液0.2ml，37℃作用1～2小時(shí)。（混合液可作成不同稀釋度）。 | a組加參考抗體和被檢抗原混合液0.2ml，另一組加參考抗體與等量稀釋劑0.2ml，37℃作用1～2小時(shí)。 |
4 | 洗滌：重復(fù)2 | 同左 | 洗滌：同左 | 洗滌 |
5 | 加入酶結(jié)合物：每凹孔加入稀釋緩沖液稀釋的酶結(jié)合物0.2ml 37℃作用1～2小時(shí) | 加入0.2ml用稀釋緩沖液稀釋的酶標(biāo)記特異性抗體溶液，37℃作用1～2小時(shí)或由預(yù)試實(shí)驗(yàn)確定作用時(shí)間。 |
| 各加入0.2ml抗參考抗體的酶結(jié)合物37℃作用1～2小時(shí) |
方法 步驟 | 間接法（測抗體） | 雙抗體夾心法 （測抗原） | 競爭法（測抗原） | 抑制性測定法 |
6 | 洗滌：重復(fù)2 | 同左 |
| 洗滌 |
7 | 加入0.2ml底物溶液于每個(gè)凹孔,(O.P.D或O.T)，室溫作用30分鐘（另作一空白對照，0.4ml底物加0.1ml終止劑）。 | 同左 | 同左 | 同左 |
8 | 加終止劑：每凹孔加2M H2SO4或2M檸檬酸0.05ml。 | 同左 | 同左 | 同左 |
9 | 觀察記錄結(jié)果：目測或用酶標(biāo)比色計(jì)測定（O.P.D用492nm）O.D值。 | 同左 | 用酶標(biāo)比色計(jì)測定a、b兩組O.D值，并求出a、b、O.D值的差數(shù) | 同左 |
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·優(yōu)勢一：用途
1.將酶催化反應(yīng)的放大作用和抗原抗體親和反應(yīng)的高度專一性、特異性相結(jié)合，以酶標(biāo)記的抗原或抗體作為主要試劑進(jìn)行免疫測試，所以具有很高的靈敏度。
2.實(shí)現(xiàn)了在細(xì)胞或亞細(xì)胞水平上示蹤抗原或抗體的所在部位，或在微克、甚至納克水平上對其進(jìn)行定量。
3.其抗原抗體反應(yīng)具有高度的特異性。
4.為濃縮液，配有稀釋液，稀釋后直接可用，無需另行配置
·優(yōu)勢二：質(zhì)量保證，服務(wù)完善
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