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技術(shù)文章

大鼠Elisa試劑盒顯色淡、背景深問題解答

更新時(shí)間:2016-01-07 瀏覽次數(shù):1534

大鼠Elisa試劑盒顯色淡、背景深問題解答
可能原因 
顯色淡,靈敏度偏低 
解決方法

1、試劑盒在運(yùn)輸途中時(shí)間太長,溫度太高 盡量縮短運(yùn)輸時(shí)間,夏季應(yīng)放冰塊降溫 

2、試劑盒未充分平衡 試劑盒從2~8℃冰箱取出后打開盒蓋,于室溫平衡至少20分鐘,確保所有試劑已平衡至室溫(約25℃)。 
3、培養(yǎng)箱溫度不足37℃ 注意培養(yǎng)箱溫度,放入反應(yīng)板后盡量減少開啟次數(shù)以免影響溫度恒定,非隔水式培養(yǎng)箱尤其應(yīng)注意 
4、保溫時(shí)間不足 校正定時(shí)鐘準(zhǔn)確定時(shí) 
5、洗滌時(shí)沖擊力太大、浸泡時(shí)間過長、洗滌次數(shù)增加 按說明書要求保留洗滌時(shí)間,準(zhǔn)確記住洗滌次數(shù) 
6、移液器吸液量不足,吸嘴內(nèi)壁掛水太多或內(nèi)壁不清潔 校正移液器,吸嘴要配套,裝吸嘴時(shí)要緊密,吸嘴內(nèi)壁要清潔,一次性使用 7、蒸餾水水質(zhì)有問題 使用新鮮合格的蒸餾水 8、底物作用時(shí)間不足 準(zhǔn)確定時(shí)

 可能原因 

背景深,全部呈有色, 
解決方法

1、洗滌不充分,洗后未拍干,樣品
中其它成分殘留或酶標(biāo)記物殘留 濃縮洗液準(zhǔn)確配制;10倍濃縮洗滌液如有結(jié)晶則應(yīng)讓結(jié)晶于室溫全部溶解后再量取稀釋;充分洗滌,*拍干。加樣或加酶拍板的濾紙應(yīng)棄去不用,不要反復(fù)使用,否則易造成污染 
2、樣品污染 
樣品應(yīng)新鮮采集,或低溫保存,防止污染 3、培養(yǎng)箱溫度超過37℃或反應(yīng)時(shí)間過長 調(diào)整培養(yǎng)箱溫度,準(zhǔn)確定時(shí) 

 

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