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首先帶大家了解下ELISA實驗原理及類型:
將已知抗體或抗原結(jié)合在某種固相載體上,并保持其免疫活性。測定時將待檢標本和酶標抗體或酶標抗原按不同步驟與固相載體表面吸附的抗體或抗原發(fā)生反應(yīng),用洗滌的方法分離抗原抗體復(fù)合物和游離物成分,然后加入底物顯色,進行定性或定量測定。
ELISA可用于檢測抗體,也可用于檢測抗原。根據(jù)檢測目的和操作步驟的不同,通常有三種類型的檢測方法。今天是十二月zui后一個工作日,上海勁馬BIM試劑盒為您分享ELISA雙抗體夾心法,競爭法,間接法示意圖解說,希望您會喜歡!
1.雙抗體夾心法 此法常用于檢測抗原。將已知抗體吸附于固相載體,加入待測標本(含相應(yīng)抗原)與之結(jié)合,溫育后洗滌,加入酶標抗體及底物溶液進行測定。見圖一。
圖一 雙抗體夾心法檢測抗原
2.競爭法 此法可用于抗原及半抗原的定量測定,也可用于測定抗體。以測定抗原為例,將特異性抗體吸附于固相載體上,加入待測抗原和一定量的已知酶標抗原,使二者競爭地與固相抗體結(jié)合,經(jīng)過洗滌分離,zui后結(jié)合于固相的酶標抗原與待測抗原含量呈負相關(guān)。見圖二。
圖二 競爭法測抗原示意圖
3.間接法 此法是檢測抗體zui常用的方法。將已知抗原吸附于固相載體上,加入待測血清(抗體)與之結(jié)合,洗滌后,加酶標抗體和底物進行測定。其原理見圖三。
圖三 ELISA間接法示意圖
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