人α1-微球蛋白（α1-MG）說明書

更新時間：2011-12-27 瀏覽次數(shù)：2609

人α 1-微球蛋白（α1-MG）酶聯(lián)免疫分析

試劑盒使用說明書

本試劑盒僅供研究使用。

檢測范圍： 96T

150ng/L -4800ng/L

使用目的：

本試劑盒用于測定人血清、血漿、尿液及相關(guān)液體樣本中α 1-微球蛋白（α1-MG）含量。實(shí)驗原理

本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中人α 1-微球蛋白（α1-MG）水平。用純化的人α 1微球蛋白（α1-MG）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入α 1-微球蛋白（α1-MG），再與 HRP標(biāo)記的α 1-微球蛋白（α1-MG）抗體結(jié)合，形成抗體 -抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過*洗滌后加底物 TMB顯色。 TMB在 HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的α 1-微球蛋白（α1-MG）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在 450nm波長下測定吸光度（ OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中人α 1-微球蛋白（α 1-MG）濃度。試劑盒組成

1	30倍濃縮洗滌液	20ml×1瓶	7	終止液	6ml×1瓶
2	酶標(biāo)試劑	6ml×1瓶	8	標(biāo)準(zhǔn)品（ 9600ng/L）	0.5ml×1瓶
3	酶標(biāo)包被板	12孔 × 8條	9	標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液	1.5ml×1瓶
4	樣品稀釋液	6ml×1瓶	10	說明書	1份
5	顯色劑 A液	6ml×1瓶	11	封板膜	2張
6	顯色劑 B液	6ml×1/瓶	12	密封袋	1個

標(biāo)本要求

1．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗。若不能馬上進(jìn)行試驗，可將標(biāo)本放于 -20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融

2．不能檢測含NaN3的樣品，因 NaN3抑制辣根過氧化物酶的（ HRP）活性。操作步驟

1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。

2.加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)孔、

待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣 50µl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40µl，然后再加待測樣品 10µl（樣品zui終稀釋度為 5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。

3.溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育 3 0分鐘。

4.配液：將 30倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30倍稀釋后備用

5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置 30秒后棄去，如此重復(fù) 5次，拍干。

6.加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑 50µl，空白孔除外。

7.溫育：操作同 3。

8.洗滌：操作同 5。

9.顯色：每孔先加入顯色劑 A50µl，再加入顯色劑 B50µl，輕輕震蕩混勻， 37℃避光顯色15分鐘.

10.終止：每孔加終止液 50µl，終止反應(yīng)（此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。

11.測定：以空白空調(diào)零， 450nm波長依序測量各孔的吸光度（ OD值）。測定應(yīng)在加終止

4800ng/L	5號標(biāo)準(zhǔn)品	150µl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2400ng/L	4號標(biāo)準(zhǔn)品	150µl的 5號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
1200ng/L	3號標(biāo)準(zhǔn)品	150µl的 4號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
600ng/L	2號標(biāo)準(zhǔn)品	150µl的 3號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
300ng/L	1號標(biāo)準(zhǔn)品	150µl的 2號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

液后 15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。操作程序總結(jié)：

計算

以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)， OD值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)樣品的 OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與 OD值計算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式，將樣品的 OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實(shí)際濃度。注意事項

1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡 15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

2．濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果。

3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在 5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。

4．請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線，做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高（樣本 OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的 OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（ n倍）后再測定，計算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。

5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6．底物請避光保存。

7．嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行，試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn) .

8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。

9．本試劑不同批號組分不得混用。 10. 如與英文說明書有異，以英文說明書為準(zhǔn)。保存條件及有效期

1．試劑盒保存：；2-8℃。

2．有效期： 6個月

人補(bǔ)體片斷3b（C3b）ELISA Kit	Human Complement fragment 3b,C3b ELISA Kit
人補(bǔ)體片斷4b（C4b）ELISA Kit	Human Complement fragment 4b,C4b ELISA Kit
人補(bǔ)體片斷5b（C5b）ELISA Kit	Human Complement fragment 5b,C5b ELISA Kit
人不對稱二甲基精氨酸（ADMA）ELISA Kit	Human asymmetrical dimethylarginine,ADMA ELISA Kit
人腎小球組織糖基化終末產(chǎn)物（GTE-AGE）ELISA Kit	Human Glomerular tissue extract-advanced glycosylation end products,GTE-AGE ELISA Kit
人組織多肽特異性抗原（TPS）ELISA Kit	Human tissue polypeptide specific antigen,TPS ELISA Kit
人組織蛋白酶D（cath-D）ELISA Kit	Human cathepsin D,cath-D ELISA Kit
人脂肪酶（Lipase）ELISA Kit	Human Lipase ELISA Kit
人幽門螺旋桿菌IgM（Hp-IgM）ELISA Kit	Human Helicobacter pylori IgM,Hp-IgM ELISA Kit
人烏頭酸酶2（ACO-2）ELISA Kit	Human aconitase 2,ACO-2 ELISA Kit
人谷氨酸脫羧酶（GAD）ELISA Kit	Human glutamic acid decarboxylase,GAD ELISA Kit
人細(xì)胞角蛋白20（CK-20）ELISA Kit	Human cytokeratin 20,CK-20 ELISA Kit
人細(xì)胞角蛋白19（CK-19）ELISA Kit	Human cytokeratin 19,CK-19 ELISA Kit
人細(xì)胞角蛋白18（CK-18）ELISA Kit	Human cytokeratin 18,CK-18 ELISA Kit
人胃泌素（Gastrin）ELISA Kit	Human Gastrin ELISA Kit
人α突觸核蛋白（α-SYN）ELISA Kit	Human α-Synuclein,α-SYN ELISA Kit
人糖鏈抗原19-9（CA19-9）ELISA Kit	Human Carbohydrate antigen19-9,CA19-9 ELISA Kit
人松弛肽/松弛素（RLN）ELISA Kit	Human Relaxin,RLN ELISA Kit
人水蛭素（Hirudin）ELISA Kit	Human Hirudin ELISA Kit
人他克莫司（FK506）ELISA Kit	Human Tacrolimus-FK506 ELISA Kit
人神經(jīng)降壓素（NT）ELISA Kit	Human Neurotensin,NT ELISA Kit
人上皮特異性抗原（ESA）ELISA Kit	Human epithelial specific antigen,ESA ELISA Kit
人上皮膜抗原（EMA）ELISA Kit	Human Epithelial membrane antigen,EMA ELISA Kit
人免疫球蛋白輕鏈lambda（λ-IgLC）ELISA Kit	Human lambda immunoglobulin light chain,λ-IgLC ELISA Kit
人溶菌酶（LZM）ELISA Kit	Human Lysozyme,LZM ELISA Kit
人凝聚素（CLU）ELISA Kit	Human clusterin,CLU ELISA Kit
人T細(xì)胞受體（TCR）ELISA Kit	Human T cell receptor,TCR ELISA Kit
人硫酸褪黑色素（MS）ELISA Kit	Human melatonin sulfate,MS ELISA Kit
人可溶性磷脂酶A2（sPL-A2）ELISA Kit	Human soluble Phospholipase A2,sPL-A2 ELISA Kit

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