服務(wù)熱線
13817140470
產(chǎn)品分類
大鼠芳香化酶（Aromatase）試劑盒
時間：2011/12/6 瀏覽次數(shù)：1427
大鼠芳香化酶（ Aromatase）酶聯(lián)免疫分析
試劑盒使用說明書
本試劑盒僅供研究使用。
檢測范圍： 96T
8.0 IU/L – 240 IU/L
使用目的：
本試劑盒用于測定大鼠血清、血漿及相關(guān)液體樣本中芳香化酶（ Aromatase）含量。實驗原理
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中大鼠芳香化酶（ Aromatase）水平。用純化的大鼠芳香化酶（ Aromatase）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入芳香化酶（ Aromatase），再與 HRP標記的芳香化酶（ Aromatase）抗體結(jié)合，形成抗體 -抗原 -酶標抗體復(fù)合物，經(jīng)過*洗滌后加底物 TMB顯色。 TMB在 HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的芳香化酶（ Aromatase）呈正相關(guān)。用酶標儀在 450nm波長下測定吸光度（ OD值），通過標準曲線計算樣品中大鼠芳香化酶（ Aromatase）濃度。試劑盒組成
| ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
標本要求
1．標本采集后盡早進行提取，提取按相關(guān)文獻進行，提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于 -20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2．不能檢測含NaN3的樣品，因 NaN3抑制辣根過氧化物酶的（ HRP）活性。操作步驟
1.標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。
2.加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、
待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣 50µl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40µl，然后再加待測樣品 10µl（樣品zui終稀釋度為 5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
3.溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育 3 0分鐘。
4.配液：將 30倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30倍稀釋后備用
5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置 30秒后棄去，如此重復(fù) 5次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶標試劑 50µl，空白孔除外。
7.溫育：操作同 3。
8.洗滌：操作同 5。
9.顯色：每孔先加入顯色劑 A50µl，再加入顯色劑 B50µl，輕輕震蕩混勻， 37℃避光顯色15分鐘.
10.終止：每孔加終止液 50µl，終止反應(yīng)（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）。
11.測定：以空白空調(diào)零， 450nm波長依序測量各孔的吸光度（ OD值）。測定應(yīng)在加終止
|
液后 15分鐘以內(nèi)進行。操作程序總結(jié)：
計算
以標準物的濃度為橫坐標， OD值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線，根據(jù)樣品的 OD值由標準曲線查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標準物的濃度與 OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的 OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實際濃度。注意事項
1 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡 15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2 濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果。
3 各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在 5分鐘內(nèi)，如標本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。
4 請每次測定的同時做標準曲線，做復(fù)孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高（樣本 OD值大于標準品孔*孔的 OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（ n倍）后再測定，計算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。
5 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6 底物請避光保存。
7 嚴格按照說明書的操作進行，試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準 .
8 所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9 本試劑不同批號組分不得混用。保存條件及有效期
10 2-8℃。
11 6個月
- (上一篇)：人端粒酶（TE）說明書
- (下一篇)：小鼠雌二醇（E2）說明書
