血漿游離血紅蛋白測定方法

時間：2012/6/20 瀏覽次數(shù)：2220

血漿游離血紅蛋白測定實驗中,介紹實驗原理、實驗方法、實驗結(jié)果計算以及注意事項.

實驗原理
血紅蛋白具有類過氧化物酶活性,可催化H2O2釋放新生態(tài)氧,使鄰甲聯(lián)苯胺氧化發(fā)生顏色變化,由無色zui終變?yōu)樗{(lán)紫色.根據(jù)顯色深淺與標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行比較,可測出其含量.
實驗方法
　　材料：
　　1．2g/L鄰甲聯(lián)苯胺溶液
　　2．1%H2O2
　　3．10%醋酸溶液
　　4．分光光度計
　　方法：
　　1.抽取靜脈血2-3ml,枸櫞酸鈉抗凝,離心分離血漿.
　　2．按下表進(jìn)行操作,用分光光度計,波長為530nm,以空白管調(diào)零,測定測定管的吸光度.

3.計算公式
　　血漿游離Hb（mg/L）=測定管吸光度/標(biāo)準(zhǔn)管吸光度×100
實驗結(jié)果計算
　　參考范圍：0-40mg/L
注意事項
　　1.一切容器避免血紅蛋白污染；
　　2.采血要順利,器皿要干燥,檢測血漿要新鮮,及時分離,防止人為溶血；
　　3.鄰聯(lián)苯胺溶液具致癌性,檢測時要小心,廢液要妥善處理,以免污染；
　　4.雙氧水要新鮮配置,濃度要準(zhǔn)確.

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