勁馬實(shí)驗(yàn)步驟之緩沖液的配制 

上海勁馬實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司按化定義緩沖溶液是由弱酸及其鹽、弱堿及其鹽組成的混合溶液，能在一定程度上抵消、減輕外加強(qiáng)酸或強(qiáng)堿對(duì)溶液酸度的影響，從而保持溶液的pH值相對(duì)穩(wěn)定。這種溶液稱為緩沖溶液。在生化研究工作中，常常需要使用緩沖溶液來維持實(shí)驗(yàn)體系的酸堿度。研究工作的溶液體系pH值的變化往往直接影響到研究工作的成效。如果“提取酶"實(shí)驗(yàn)體系的pH值變動(dòng)或大幅度變動(dòng)，酶活性就會(huì)下降甚至*喪失。所以配制緩沖溶液是一個(gè)*的關(guān)鍵步驟。一起跟隨小編來看看以下步驟吧！讓您更多的了解緩沖溶液的配置情況。

（一）緩沖液的組成緩沖液的組成        
緩沖液是臨床生化診斷試劑的重要組成部分。由于它對(duì)外來的H+和OH-有雙向調(diào)節(jié)作用，因而能為酶試劑中的待測(cè)物質(zhì)反應(yīng)提供zui適pH，以利于這些酶zui大限度地發(fā)揮其催化效能；也為以酸堿指示染料作為顯色劑的試劑提供穩(wěn)定的pH環(huán)境，以保證這些試劑和方法有準(zhǔn)確可靠的測(cè)定結(jié)果。

一般的緩沖劑都由一共軛酸及一共軛堿組成?！八嵝?緩沖液含有一弱酸及其鹽（共軛堿）；“堿性"緩沖液含有弱堿及其鹽（共軛酸）。共軛酸和共軛堿一起可阻止溶液pH發(fā)生劇烈的變化。當(dāng)向溶液中加入H+時(shí)，共軛堿可與之部  分地結(jié)合而共軛酸，H+不再成游離狀態(tài)存在；當(dāng)加入OH-時(shí)，則共軛酸與之結(jié)合水及共軛堿，使OH-不再以游離狀態(tài)存在而影響溶液的酸堿度。

（二）緩沖液的緩沖容量緩沖液的緩沖容量        
緩沖液維持pH恒定的效力取決于其緩沖容量的大小。緩沖容量是指使1L溶液的pH改變個(gè)1pH單位所需要的酸或堿量（mol）。緩沖容量決定于鹽與酸（或堿）的真實(shí)濃度及兩者的比值。緩沖液的濃度越高，緩沖容量越大。一般的緩沖液總濃度在0.05～0.2mol/L之間。當(dāng)總濃度固定時(shí)，鹽與酸（或堿）的比值為1時(shí)，其緩沖容量zui大；如果兩者比值相差10倍以上時(shí)，則緩沖容量將大為減小。在實(shí)際工作中，不能無限制地加大緩沖液的濃度來增加其緩沖容量，因?yàn)辂}類濃度過高將抑制酶的活性，對(duì)電泳分離也有不利的影響。
被稀釋或加入中性鹽時(shí)，其pH能基本維持恒定。在一般情況下，將緩沖液稀釋1倍，其pH值只改變一個(gè)pH單位的百分之幾；加入0.1mol/L中性鹽溶液，只使pH值大約改變0.1。但是溫度的改變不可忽視，如0.025mol/L混合磷酸鹽緩沖液（用GR磷酸二氫鉀3.4g，GR磷酸氫二鈉3.55g，溶解于雙蒸餾水至1000ml），在5℃時(shí)pH為6.95，15℃時(shí)為6.90，25℃時(shí)為6.86，35℃時(shí)為6.84。故對(duì)pH要求精密時(shí)必須注意做溫度補(bǔ)償，以消除由于不同溫度所產(chǎn)生的測(cè)定誤差。 

（三）配制緩沖液的注意事項(xiàng)配制緩沖液的注意事項(xiàng)  
1．所有試劑選用分析純或優(yōu)級(jí)純，并必須恒重后方能配制。具體的恒重方法因試劑種類而有不同，如：①琥珀酸、甘氨酸、巴比妥及其鈉鹽放在氯化鈣干燥器中至恒重；②用檸檬酸鈉（含2H2O）及檸檬酸（含H2O）不需恒重直接配制其溶液；③無水醋酸鈉，在100℃下干燥3h。④醋酸溶液用分析冰醋酸直接配制，然后再用氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)液進(jìn)行標(biāo)定。 
2．所用儀器必須清潔，容量?jī)x器經(jīng)過校正，以保證準(zhǔn)確。 
3．配好的緩沖液必須用酸度計(jì)校正其pH值（準(zhǔn)確至小數(shù)點(diǎn)后兩位）。如對(duì)其濃度有懷疑時(shí)，則應(yīng)用滴定法檢查其濃度。

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以下是緩沖試劑部分試劑展示：