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產(chǎn)品名稱：
5-LOX,大鼠5脂加氧酶酶聯(lián)免疫試劑盒技術(shù)指導(dǎo)
產(chǎn)品型號(hào)：更新時(shí)間： 2017-06-27描述：5-LOX,大鼠5脂加氧酶酶聯(lián)免疫試劑盒技術(shù)指導(dǎo)用于體外定量檢測血清、血漿、組織、細(xì)胞上清及相關(guān)液體樣本中大鼠5脂加氧酶（5-LOX）的含量。
產(chǎn)品介紹
l 本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織、細(xì)胞上清及相關(guān)液體樣本中大鼠5脂加氧酶（5-LOX）的含量。
l 有效期：6個(gè)月
l 保存條件：2-8℃
l 本試劑盒僅供體外研究使用，不用于臨床診斷
實(shí)驗(yàn)原理
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。往預(yù)先包被大鼠5脂加氧酶（5-LOX）捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的大鼠5脂加氧酶（5-LOX）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計(jì)算樣品濃度。
5-LOX,大鼠5脂加氧酶酶聯(lián)免疫試劑盒技術(shù)指導(dǎo)操作步驟
（一）樣品準(zhǔn)備
1.取動(dòng)物全血按常規(guī)方法制備血清，要求血清清亮，無溶血、無污染。樣品1周內(nèi)可于2～8℃保存，長期需置-20℃保存。
2.用樣品稀釋液將待檢血清按100倍稀釋（如2μl血清加入198μl樣品稀釋液中，混勻）。陰、陽性對照不用稀釋。
3.濃縮洗滌液使用前應(yīng)恢復(fù)至室溫使沉淀溶解，然后用蒸餾水或去離子水作20倍稀釋。
（二）檢驗(yàn)方法
1.使用前將試劑盒置室溫30分鐘，恢復(fù)至室溫。
2.取所需用量酶標(biāo)板條，設(shè)空白對照1孔、陰性/陽性對照各2孔，未用的板條盡快密封，2～8℃保存。
3.空白對照孔加樣品稀釋液100μl；陰、陽性對照孔分別加入陰、陽性對照100μl；樣品孔每孔加入稀釋后的樣品100μl。
4.混勻，置37℃反應(yīng)30分鐘。
5.扣去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，重復(fù)洗滌5次，拍干。
6.每孔加酶標(biāo)記物100μl（空白孔除外）。置37℃反應(yīng)30分鐘。
7.洗滌，同步驟5。
8.每孔依次加底物液A、底物液B各50μl，混勻，37℃避光反應(yīng)10分鐘。
9.每孔加終止液50μl，混勻，用空白孔調(diào)零，于450nm(可用630nm作參比波長）測定各孔吸光值（A值）。
5-LOX,大鼠5脂加氧酶酶聯(lián)免疫試劑盒技術(shù)指導(dǎo)注意事項(xiàng)
1. 當(dāng)混合蛋白溶液時(shí)應(yīng)盡量輕緩，避免起泡。
2. 洗滌過程非常重要，不充分的洗滌易造成假陽性。
3. 一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。
4. 請每次測定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，做復(fù)孔。
5. 如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高，請先稀釋后再測定，計(jì)算時(shí)請zui后乘以稀釋倍數(shù)。
6. 在配制標(biāo)準(zhǔn)品、檢測溶液工作液時(shí)，請以相應(yīng)的稀釋液配制，不能混淆。
7. 底物請避光保存。
8. 不要用其它生產(chǎn)廠家的試劑替換試劑盒中的試劑。
ELISA試劑盒優(yōu)點(diǎn)：
我司共有14000余種ELISA試劑盒物種涵蓋Human,Mouse,Rat等，品種具備以下優(yōu)點(diǎn)：
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高度靈敏—可檢測到pg/mL級別的目標(biāo)
種類齊全—可覆蓋人、大鼠、小鼠、棉鼠、獼猴、豬、馬、犬和貓等多個(gè)種屬
優(yōu)化設(shè)計(jì)—可拆卸式96孔板(12X8)，為血清、血漿、尿樣和細(xì)胞培養(yǎng)物樣本檢測進(jìn)行優(yōu)化
問題解答
Elisa試劑盒陰性對照及陽性對照解析
Elisa試劑盒陰性對照及陽性對照：陰、陽性對照若有正確的結(jié)果，對試劑盒操作的結(jié)果可以有粗略的判斷。
空白對照：對ELISA試劑來說，空白對照實(shí)際上是不加標(biāo)本不加酶做對照?？瞻讓φ罩饕獪y系統(tǒng)的吸光率?？瞻讓φ赵趩尾ㄩL測量時(shí)顯得尤其重要
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