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產(chǎn)品中心產(chǎn)品介紹
產(chǎn)品名稱:人神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白1(NRG-1)ELISA試劑盒
性 狀:液體
適用于:科研實驗
公司服務:免費代測 含稅含運費
檢測方法:酶聯(lián)免疫法/酶免法(ELISA)
待檢樣本:體液,血清,血漿,細胞培養(yǎng)上清液,尿液,組織勻漿,心房水標本等等。
DIY夾心法ELISA常見技術指南:
1、選擇抗體時選擇一個單抗和一個多抗進行配對;若選擇兩個單抗,必須識別不同表位的抗體;從同一家公司選擇抗體對。
2、ELISA實驗中為了確定*信號和zui低背景應將捕獲抗體(0.5-4μg/ml)和檢測抗體(0.25-2μg/ml)在預實驗中進行彼此相抗的滴定。同時,應包括在適當范圍內(nèi)的標準品的系列稀釋。按試劑說明書常規(guī)提供的范圍進行操作。
3、標準品的配制:對于每種細胞因子應仔細閱讀說明書,注意每批的細節(jié)。在使用細胞因子前,瞬時離心試劑瓶,盡可能多地收回其中的細胞因子。根據(jù)每批說明書中的細節(jié),將凍干的細胞因子復溶。
4、一般待測抗原標準曲線的線性范圍的可通過將標準品做8次2倍系列稀釋從2000pg/ml 到15pg/ml。可利用標準的ELISA操作流程、放大試劑盒、第三類試劑、或改變酶底物系統(tǒng)可在一定范圍內(nèi)提高靈敏度。
5、為了優(yōu)化靈敏度,建議過夜孵育標準品和標本。
6、若使用過氧化物酶作為顯色系統(tǒng),應嚴禁在洗液和稀釋液中加疊氮鈉,疊氮鈉可抑制過氧化物酶的活性。
7、當測定混合液體中的抗原時,如血清,建議在標本稀釋液中加不相干的Ig。
Elisa試劑盒實驗規(guī)則:
1、要保證移液槍的準確性,誤差不能超過2%??捎盟碗娮犹炱竭M行確定。但有專業(yè)人員進行矯正。
2、要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支。吸取不同的液體后,要更換槍頭。即使是吸取標準品時。
3、要在實驗前1小時將試劑盒從冰箱中取出,使各種試劑都恢復到室溫,以使結(jié)果更穩(wěn)定。
4、實驗時,要使底物避光保存。
5、用槍吸取液體時速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準確。
6、吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
操作程序總結(jié):
1.準備試劑,樣品和標準品
2.加入準備好的樣品和標準品,37℃反應30分鐘
3.洗板5次,加入酶標試劑,37℃反應30分鐘
4.洗板5次,加入顯色液A、B,37℃反應10分鐘
5.加入終止液
6.15分鐘之內(nèi)度OD值
7.計算
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