產(chǎn)品名稱：人生長激素釋放肽ghrelinELISA試劑盒,進口人生長激素釋放肽ghrelinELISA試劑盒

計算：

以標準物的濃度為橫坐標（對數(shù)坐標），OD值為縱坐標（普通坐標），在半對數(shù)坐標紙上繪出標準曲線，根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實際濃度。

加樣：分別設(shè)空白孔、標準孔、待測樣品孔?？瞻卓准訕悠废♂屢?00μl，余孔分別加標準品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，酶標板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘。

注意事項：

1.當混合蛋白溶液時應(yīng)盡量輕緩，避免起泡。 

2.洗滌過程非常重要，不充分的洗滌易造成假陽性。 

3.一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi)，如標本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。 

4.請每次測定的同時做標準曲線，做復(fù)孔。 

5.如標本中待測物質(zhì)含量過高，請先稀釋后再測定，計算時請zui后乘以稀釋倍數(shù)。 

6.在配制標準品、檢測溶液工作液時，請以相應(yīng)的稀釋液配制，不能混淆。 

7.底物請避光保存。 

8.不要用其它生產(chǎn)廠家的試劑替換試劑盒中的試劑。 

9.試劑盒保存：未開封的試劑盒應(yīng)儲存于2-8℃；開封后的酶標板應(yīng)與干燥劑一起儲存于鋁箔袋中置于2-8℃保存。僅在此出儲存條件下，產(chǎn)品在有效期內(nèi)可正常使用。 

10.濃洗滌液低溫保存會有鹽析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶。 

11.剛開啟的酶聯(lián)板孔中可能會含有少許水樣物質(zhì)，此為正?，F(xiàn)象，不會對實驗結(jié)果造成任何影響。

試劑盒組成及試劑配制 

1. 酶聯(lián)板：一塊（96孔） 

2. 標準品（凍干品）：2瓶，每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml，蓋好后靜置10分鐘以上，然后反復(fù)顛倒/搓動以助溶解，其濃度為100 ng/ml，做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進行倍比稀釋）后，分別稀釋成100 ng/ml，50 ng/ml，25 ng/ml，12.5 ng/ml，6.25 ng/ml，3.12 ng/ml，1.56 ng/ml，樣品稀釋液直接作為標準濃度0 ng/ml，臨用前15分鐘內(nèi)配制。

如配制50 ng/ml標準品：取0.5ml （不要少于0.5ml ） 100 ng/ml的上述標準品加入含有0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。

3. 樣品稀釋液：1×20ml/瓶。

4. 檢測稀釋液A：1×10ml/瓶。

5. 檢測稀釋液B：1×10ml/瓶。

6. 檢測溶液A：1×120ul/瓶（1:100）臨用前以檢測稀釋液A 1:100稀釋，稀釋前根據(jù)預(yù)先計算好的每次實驗所需的總量配制（100ul/孔），實際配制時應(yīng)多配制0.1-0.2ml。如10ul檢測溶液A加990ul檢測稀釋液A的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時內(nèi)配制。

7. 檢測溶液B：1×120ul/瓶（1:100）臨用前以檢測稀釋液B 1:100稀釋。稀釋方法同檢測溶液A。

8. 底物溶液：1×10ml/瓶。 

9. 濃洗滌液：1×30ml/瓶，使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。 

10. 終止液：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。 

注：以上標本置4℃保存應(yīng)小于1周，-20℃或-80℃均應(yīng)密封保存，-20℃不應(yīng)超過1個月，-80℃不應(yīng)超過2個月；標本溶血會影響zui后檢測結(jié)果，因此溶血標本不宜進行此項檢測；高血脂的標本不需進行特殊處理，可直接檢測。

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