產(chǎn)品名稱：人真胰島素ELISA試劑盒,上海人真胰島素ELISA試劑盒

計(jì)算：

以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)（對(duì)數(shù)坐標(biāo)），OD值為縱坐標(biāo)（普通坐標(biāo)），在半對(duì)數(shù)坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計(jì)算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實(shí)際濃度。

加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔?？瞻卓准訕悠废♂屢?00μl，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘。

注意事項(xiàng)：

1.當(dāng)混合蛋白溶液時(shí)應(yīng)盡量輕緩，避免起泡。 

2.洗滌過程非常重要，不充分的洗滌易造成假陽性。 

3.一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。 

4.請(qǐng)每次測定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，做復(fù)孔。 

5.如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高，請(qǐng)先稀釋后再測定，計(jì)算時(shí)請(qǐng)zui后乘以稀釋倍數(shù)。 

6.在配制標(biāo)準(zhǔn)品、檢測溶液工作液時(shí)，請(qǐng)以相應(yīng)的稀釋液配制，不能混淆。 

7.底物請(qǐng)避光保存。 

8.不要用其它生產(chǎn)廠家的試劑替換試劑盒中的試劑。 

9.試劑盒保存：未開封的試劑盒應(yīng)儲(chǔ)存于2-8℃；開封后的酶標(biāo)板應(yīng)與干燥劑一起儲(chǔ)存于鋁箔袋中置于2-8℃保存。僅在此出儲(chǔ)存條件下，產(chǎn)品在有效期內(nèi)可正常使用。 

10.濃洗滌液低溫保存會(huì)有鹽析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶。 

11.剛開啟的酶聯(lián)板孔中可能會(huì)含有少許水樣物質(zhì)，此為正常現(xiàn)象，不會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成任何影響。

試劑盒組成及試劑配制 

1. 酶聯(lián)板：一塊（96孔） 

2. 標(biāo)準(zhǔn)品（凍干品）：2瓶，每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml，蓋好后靜置10分鐘以上，然后反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解，其濃度為100 ng/ml，做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋）后，分別稀釋成100 ng/ml，50 ng/ml，25 ng/ml，12.5 ng/ml，6.25 ng/ml，3.12 ng/ml，1.56 ng/ml，樣品稀釋液直接作為標(biāo)準(zhǔn)濃度0 ng/ml，臨用前15分鐘內(nèi)配制。

如配制50 ng/ml標(biāo)準(zhǔn)品：取0.5ml （不要少于0.5ml ） 100 ng/ml的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。

3. 樣品稀釋液：1×20ml/瓶。

4. 檢測稀釋液A：1×10ml/瓶。

5. 檢測稀釋液B：1×10ml/瓶。

6. 檢測溶液A：1×120ul/瓶（1:100）臨用前以檢測稀釋液A 1:100稀釋，稀釋前根據(jù)預(yù)先計(jì)算好的每次實(shí)驗(yàn)所需的總量配制（100ul/孔），實(shí)際配制時(shí)應(yīng)多配制0.1-0.2ml。如10ul檢測溶液A加990ul檢測稀釋液A的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時(shí)內(nèi)配制。

7. 檢測溶液B：1×120ul/瓶（1:100）臨用前以檢測稀釋液B 1:100稀釋。稀釋方法同檢測溶液A。

8. 底物溶液：1×10ml/瓶。 

9. 濃洗滌液：1×30ml/瓶，使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。 

10. 終止液：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。 

注：以上標(biāo)本置4℃保存應(yīng)小于1周，-20℃或-80℃均應(yīng)密封保存，-20℃不應(yīng)超過1個(gè)月，-80℃不應(yīng)超過2個(gè)月；標(biāo)本溶血會(huì)影響zui后檢測結(jié)果，因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項(xiàng)檢測；高血脂的標(biāo)本不需進(jìn)行特殊處理，可直接檢測。

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