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產(chǎn)品中心產(chǎn)品介紹
兔白介素17(IL-17)ELISA試劑盒樣品采集:
收集標本前必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定。對收集后當天進行檢測的標本,儲存在4℃?zhèn)溆?,如有特殊原因需要周期收集標本,將標本及時分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存。避免反復凍融。標本2-8℃可保存48小時,-20℃可保存1個月。-70度可保存6個月。部分激素類標本需添加抑肽酶。
本公司對所有售出產(chǎn)品保證質(zhì)量,并提供良好的售后服務。
一、操作因素對ELISA結果的影響
ELISA操作步驟復雜,操作不當將引起較大的誤差。以下敘述各個步驟中的影響因素。
1.加樣
2.溫育
3.洗滌
4.顯色
5.比色
二、灰區(qū)的設置
通常情況下,ELISA定性實驗以“陽性"和“陰性"來報告結果,兩者間有一條分界線被稱為“陽性判斷值"(cut-off value,CO值),這是定性免疫測定結果報告的依據(jù)。
三、標本復查
ELISA手工檢測過程復雜,影響因素較多,即使室內(nèi)質(zhì)控在控,也可能因孔間差異而造成結果的差異,因此加大復查力度是保證結果準確性的可靠方法,比如對HBsAg、HBeAg、HCV-Ab、HIV-Ab、TP-Ab等項目的可疑、弱陽性標本及少見模式的檢測結果進行復查。
四、結果判斷
常用下列幾種方法表示結果:
1.定性測定
2.半定量測定 結果一般以滴度表示。
3.定量測定 即用已知量的標準品作一系列稀釋后進行ELISA測定,繪制標準曲線,結果以量或單位表示。在ELISA定量檢測中每一塊反應板都必須繪制相應的標準曲線。
本試劑盒僅用于科研,不能用于臨床診斷!
兔白介素17(IL-17)ELISA試劑盒操作步驟:
用于檢測未知抗體的間接法:
用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃過夜。次日洗滌3次。
↓
加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育1小時,洗滌。(同時做空白、陰性及陽性孔對照)
↓
于反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標第二抗體(抗抗體)0.1ml, 37℃孵育30-60分鐘,洗滌,zui后一遍用DDW洗滌。
↓
加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘。
↓
終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml。
↓
結果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結果:反應孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+"、“-"號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。
本公司提供各種種屬各種系列ELISA檢測試劑盒,主要用于科研方面,不用于臨床診斷??梢杂糜跈z測各種指標。
樣品要求
·客戶需提供待檢測抗體和包被用抗原。
·檢測的樣本為細胞培養(yǎng)上清、人和動物的血清、血漿。
·樣本收集后應立即-20℃保存,若長期保存應-70℃。
·樣本量的要求:若一個指標做復孔檢測應不少于250ul,做單孔檢測應不少于120ul。建議若客
戶樣本量充足提供500ul以上。
·客戶的樣本收集后,立即按要求保存,切忌反復凍融。外地客戶郵寄需要用干冰運輸。郵寄前請與溝通確認。
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