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產(chǎn)品中心產(chǎn)品介紹
【鴨主要組織相容性復合體(MHC)ELISA試劑盒詳細說明】
本試劑盒僅供研究使用
檢測范圍:歡迎或或索取原版說明書
zui低檢測限:歡迎或或索取原版說明書,歡迎選購!
有效期:6個月
預期應用:ELISA法定量測定血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清或其它相關生物液體中的含量。
說明
1.試劑盒保存:-20℃(較長時間不用時);2-8℃(頻繁使用時)。
2.濃洗滌液低溫保存會有鹽析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶。
3.中、英文說明書可能會有不*之處,請以英文說明書為準。
4.剛開啟的酶聯(lián)板孔中可能會含有少許水樣物質,此為正?,F(xiàn)象,不會對實驗結果造成任何影響。
鴨主要組織相容性復合體(MHC)ELISA試劑盒實驗原理: 用純化的抗體包被微孔板,制成固相載體,往包被抗體的微孔中依次加入標本或者標準品、生物素化的抗體、HRP-標記的親和素,經(jīng)過*洗滌后用底物顯色。底物在過氧化物酶的催化下轉化成藍色, 并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。 顏色的深淺和樣品中的目標蛋白呈正相關。用酶標儀在(450nm)波長下測定測定O.D.值(吸光度),計算樣品濃度。
自備物品
1. 酶標儀(建議參考儀器使用說明提前預熱)
2. 微量加液器及吸頭,EP 管
3. 蒸餾水或去離子水,全新濾紙 標本的采集及保存
1. 血清:全血標本請于室溫放置 2 小時或 4℃過夜后于 1000 x g 離心 20 分鐘,取上清即可
檢測,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
2. 血漿:可用 EDTA 或肝素作為抗凝劑,標本采集后 30 分鐘內于 2 - 8° C 1000 x g 離心 15
分鐘,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
3. 細胞培養(yǎng)物上清或其它生物標本:請 1000 x g 離心 20 分鐘,取上清即可檢測,或將標本
放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
注:以上標本置 4℃保存應小于 1 周,-20℃或-80℃均應密封保存,-20℃不應超過 1 個月,-80℃
不應超過 2 個月;標本溶血會影響zui后檢測結果,因此溶血標本不宜進行此項檢測。
樣本處理:血清或血漿標本推薦稀釋 10 倍,如:稀釋 10 倍,取 100uL 血清或血漿加入 900uL
樣品稀釋液。建議各實驗室在操作前行預實驗以建立*稀釋倍數(shù)。
試劑準備不當可能影響酶聯(lián)免疫吸附測定ELISA結果
在實驗室,對試劑準備一般不太注意,通常的做法是,在實驗時將試劑從冰箱中拿出來即用,而忽略了這種做法有可能影響后面溫育時間不夠的問題,其直接的后果是對一些弱陽性標本的檢測出現(xiàn)假陰性。
因此,在ELISA測定中試劑的準備zui為關鍵的是,在實驗開始前,將試劑盒先從冰箱中拿出來,在室溫下放置20min以上后,再進行測定,以使試劑盒在使用前與室溫平衡。這樣做的目的,主要是為了在后面的溫育反應步驟中,能使反應微孔內的溫度較快地達到所要求的高度,以滿足測定要求。其次,目前的商品ELISA試劑盒中的洗板液均需在實驗室使用時對所提供的濃縮液稀釋配制,因此稀釋時所用的蒸餾水或去離子水應保證質量。
此外,當試劑盒以OPD為底物時,則底物溶液應在反應顯色前臨時配制。
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