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產(chǎn)品中心產(chǎn)品介紹
鴨子碳酸酐酶(CA)ELISA試劑盒組成及試劑配制
1. 酶聯(lián)板:一塊(96孔)
2. 標準品(凍干品):2瓶,每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml,蓋好后靜置10分鐘以上,然后反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為1,600 pg/ml,將其稀釋為400 pg/ml后,再做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別稀釋成400 pg/ml,200 pg/ml,100 pg/ml,50 pg/ml,25 pg/ml,12.5 pg/ml,6.25 pg/ml,樣品稀釋液直接作為標準濃度0 pg/ml,臨用前15分鐘內(nèi)配制。如配制200 pg/ml標準品:取0.5ml (不要少于0.5ml ) 400 pg/ml的上述標準品加入含有0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3. 樣品稀釋液:1×20ml。
4. 檢測稀釋液A:1×10ml。
5. 檢測稀釋液B:1×10ml。
6. 檢測溶液A:1×120μl(1:100)臨用前以檢測稀釋液A 1:100稀釋,稀釋前根據(jù)預(yù)先計算好的每次實驗所需的總量配制(100μl/孔),實際配制時應(yīng)多配制0.1-0.2ml。如10μl檢測溶液A加990μl檢測稀釋液A的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內(nèi)配制。
7. 檢測溶液B:1×120μl/瓶(1:100)臨用前以檢測稀釋液B 1:100稀釋。稀釋方法同檢測溶液A。
8. 底物溶液:1×10ml/瓶。
9. 濃洗滌液:1×30ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10. 終止液:1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
11. 覆膜:5張
12. 使用說明書:1份
鴨子碳酸酐酶(CA)ELISA試劑盒操作常見問題:
1.邊緣效應(yīng) 使用96孔板的ELISA測定中,常發(fā)現(xiàn)有“邊緣效應(yīng)",即外周孔顯色較中心孔深。經(jīng)研究證實在溫育中的熱力學梯度可能是根本原因之所。聚苯乙烯本身為不良熱導(dǎo)體,在實驗室的常規(guī)ELISA測定中,將板從室溫(通常在25℃左右)置于37℃溫箱,板也升溫時,在外周孔與中心孔之間可能存在一熱力學梯度。因此使用水浴或在將反應(yīng)溶液加入至板孔中時,將板和溶液均加熱至溫育溫度(如37℃),就可以很容易地排除“邊緣效應(yīng)",并且可提高測定的重復(fù)性。
2.加樣,在現(xiàn)在的ELISA商品試劑盒中,必然有使用微量加樣器加入樣本的步驟。注意的關(guān)鍵點是:加樣不可太快,要避免加在孔壁上部,不可濺出和產(chǎn)生氣泡。加樣太快,無法保證微量加樣的準確性和均一性。加在孔壁上部的非包被區(qū),易導(dǎo)致非特異吸附。濺出會對鄰近孔產(chǎn)生污染。出現(xiàn)氣泡則反應(yīng)液界面有差異。所以,有時候一份標本用相同的試劑盒這次測定為陽性,下次測定為陰性,往往就是上述加樣及試劑的錯誤所致。
說明:
1.檢測原理:采用雙抗體夾心ABC-ELISA法
2.試劑盒保存:-20℃(較長時間不用時);2-8℃(頻繁使用時)。
3.濃洗滌液低溫保存會有鹽析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶。
4.中、英文說明書可能會有不*之處,請以英文說明書為準。
5.剛開啟的酶聯(lián)板孔中可能會含有少許水樣物質(zhì),此為正?,F(xiàn)象,不會對實驗結(jié)果造成任何影響。
上海勁馬提醒您:
1.試劑盒僅供研究使用,不得用于臨床實驗或小鼠體實驗,否則所產(chǎn)生的一切后果,由實驗者承擔,本公司概不負責。
2.嚴格按照說明書操作,不同批號不可交換使用,實驗者違反說明書操作,后果由實驗者承擔。為您提供產(chǎn)品咨詢,產(chǎn)品報價,酶聯(lián)免疫試劑盒說明書。公司承接生物實驗室實驗外包服務(wù),可提供11實驗代測,專業(yè)的服務(wù)為您的科研項目節(jié)省時間成本,更高效,更準確,更便捷。
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