服務(wù)熱線
13817140470
歡迎訪問上海勁馬實驗設(shè)備有限公司網(wǎng)站
13817140470您的位置:首頁 > 產(chǎn)品中心 > ELISA試劑盒 > 魚ELISA試劑盒 > 魚促腎上腺皮質(zhì)激素Elisa試劑盒
產(chǎn)品中心產(chǎn)品介紹
一、“魚促腎上腺皮質(zhì)激素Elisa試劑盒"詳細(xì)參數(shù)
【檢測方法】:酶聯(lián)免疫法/酶免法(ELISA)
【產(chǎn)品性狀】:96T/48T,盒裝液體(兩種統(tǒng)一規(guī)格)
【貯藏條件】:2-8°C
【產(chǎn)品有效期】:二年,我公司Elisa試劑盒均為批次,可放心購買。
【產(chǎn)品主要成分】:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等。
【種屬】馬鈴薯、鹿、羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動植物。
【產(chǎn)品單價】(具體折扣),可免費代測,含稅含運費。
【標(biāo)本】血清、血漿、細(xì)胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等
注:標(biāo)本必須為液體,不含沉淀。
二、“魚促腎上腺皮質(zhì)激素Elisa試劑盒"的四大特性
1.特異性強(qiáng):不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。
2.重復(fù)性好:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。
3.穩(wěn)定性高:實驗效果很穩(wěn)定。
4.超靈敏度:zui小的檢測濃度小于1號標(biāo)準(zhǔn)品,稀釋度和樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。
三、“試劑盒"具體操作方法
以雙抗體夾心法為例展示:
1、雙抗體夾心法檢測抗原
操作步驟如下:
1)將特異性抗體與固相載體結(jié)合,形成固相抗體。洗滌除去尚未結(jié)
合的抗體及一些雜質(zhì)。
2)加入待測標(biāo)本,保溫反應(yīng)。標(biāo)本中的抗原與固相抗體結(jié)合,形成固相抗原抗體復(fù)合物。洗滌除去其他未結(jié)合物質(zhì)。
3)加酶標(biāo)抗體,保溫反應(yīng)。固相免疫復(fù)合物上的抗原與酶標(biāo)抗體結(jié)合。*洗滌未結(jié)合的酶標(biāo)抗體。此時固相載體上帶有的酶量與標(biāo)本中受檢抗原的量相關(guān)。
4)加底物顯色。固相上的酶催化底物成為有色產(chǎn)物。通過比色,測知標(biāo)本中抗原的量。在臨床檢驗中,此法適用于檢驗各種蛋白質(zhì)等大分子抗原,例如 HBeAg、HBsAg、hCG 、AFP等。只要獲得針對受檢抗原的特異性抗體,就可用于包被固相載體和制備酶結(jié)合物而建立此法。如抗體的來源為抗血清,包被和酶標(biāo)所使用的抗體分別取自不同種屬的動物。如應(yīng)用單克隆抗體,一般選擇兩個針對抗原上不同決定簇的單抗,分別用于包被固相載體和制備酶結(jié)合物。這種雙位點夾心法具有很高的特異性,而且可以將受檢標(biāo)本和酶標(biāo)抗體一起保溫反應(yīng),作一步檢測。
在一步法測定中,當(dāng)標(biāo)本中受檢抗原的含量很高時,過量抗原分別和固相抗體及酶標(biāo)抗體結(jié)合,而不再形成"夾心復(fù)合物"。類同于沉淀反應(yīng)中抗原過剩的后帶現(xiàn)象,此時反應(yīng)后顯色的吸光值(位于抗原過剩帶上)與標(biāo)準(zhǔn)曲線(位于抗體過剩帶上)某一抗原濃度的吸光值相同,如按常法測讀,所得結(jié)果將低于實際的含量,這種現(xiàn)象被為鉤狀效應(yīng)(hook effect),因為標(biāo)準(zhǔn)曲線到達(dá)高峰后呈鉤狀彎落。鉤狀效應(yīng)嚴(yán)重時,反應(yīng)甚至可不顯色而出現(xiàn)假陰性結(jié)果。因此在使用一步法試劑測定標(biāo)本中含量可異常增高的物質(zhì)(例如血清中 HBsAg、AFP 和尿液 hCG 等)時,應(yīng)注意可測范圍的zui高值。用高親和力的單克隆抗體制備此類試劑可削弱鉤狀效應(yīng)。
四、樣本處理五部曲
Elisa試劑盒樣本前處理是酶聯(lián)免疫試驗中關(guān)鍵的一步,稍有不慎將導(dǎo)致實驗滿盤皆輸,如何安全,快捷的處理樣本,樣本處理五部曲助您精彩實驗。
1 均質(zhì)
組織樣本:肉、肝食品類切細(xì),用絞肉機(jī)反復(fù)絞碎,混合均勻。
水產(chǎn)樣本:去除樣品的非食用部分,食用部分切細(xì),用均質(zhì)器均漿;原料表面較臟時,需適當(dāng)用蒸餾水清洗。
蛋類:鮮蛋去殼,蛋黃和蛋白充分混勻。
水果、蔬菜類:先用水洗去泥沙,然后除去表面的水分,取食用部分。
2 振蕩提取
將提取溶劑加入到裝有樣品的具塞容器中,振蕩,使提取溶劑與容器內(nèi)的樣品充分接觸以深入到樣本組織內(nèi)部,提取待測組分。
2.1振蕩方式:振蕩器上進(jìn)行上下、往返式振蕩、手搖式上下振蕩。
2.2 在組織樣本中加入有機(jī)溶劑之間提取時,應(yīng)邊加邊振蕩,防止組織凝結(jié)成團(tuán),不利于提取。
3. 在用有機(jī)溶劑提取過程中,如果出現(xiàn)乳化現(xiàn)象,解決的方法有:①用細(xì)頭輕輕的攪拌,破壞乳化后,再重復(fù)離心。②再加入適量的提取劑,重新振蕩。注意離心后要保證樣本的稀釋倍數(shù)不變。
4 濃縮
由于凈化過程中引入的溶劑,可能會降低待測組分的濃度或者不適宜直接分析,需要去除全部有機(jī)溶劑。即試劑盒前處理步驟中把樣本在60℃氮氣下吹干,再用復(fù)溶液溶解干燥殘留物。
濃縮方式:
氮氣吹干除雜、壓縮空氣吹干除雜。
注意:
1在吹干樣本之前,用甲醇清洗針頭,防止雜質(zhì)干擾。
2在吹樣本時,針頭應(yīng)在液面上空,避免與樣本接觸,防止產(chǎn)生交叉污染。
3樣本吹干后應(yīng)立即取下,避免吹的時間過長,影響zui終檢測結(jié)果。
4不同的藥物,吹干后樣本的保質(zhì)期不同,提倡待樣本回到室溫后立即復(fù)溶。
5 凈化
經(jīng)過提取的待測組分中通常含有一些會干擾試劑盒中抗原抗體反應(yīng)的雜質(zhì)或者是含有與待測物結(jié)構(gòu)相似的雜質(zhì)。將待測組分與雜質(zhì)分離的過程,我們稱為試劑盒中樣本的凈化。在我們現(xiàn)有的試劑盒前處理方法中涉及到的zui常見的凈化是:液液分配法。
比如:用復(fù)溶液溶解干燥殘留物之前先加入適量的正己烷,在加入正己烷和復(fù)溶液渦動后如果出現(xiàn)乳化現(xiàn)象,可以60℃水浴加熱,至乳化現(xiàn)象消失或減弱后,加大離心轉(zhuǎn)速進(jìn)行離心。
五、判定結(jié)果計算
對于新入行不久,對ELISA的結(jié)果分析這塊不太熟悉??蛻舻膶嶒炇峭ㄟ^人源的蛋白作為抗原,兔源多克隆抗體作為一抗(我們就是為了通過做ELISA來檢測其效價),然后通過辣根過氧化物作為二抗及顯色組分。實驗做完了,但不知道怎么分析結(jié)果,例如標(biāo)準(zhǔn)曲線怎么做之類的。另外,還想問一下,有沒有實用的軟件可用來分析。對于客戶的問題回答:
間接ELISA要是試劑盒,會有標(biāo)準(zhǔn)品的,把標(biāo)準(zhǔn)品按一定濃度梯度稀釋一塊兒做(一般有三個重復(fù)),zui后酶標(biāo)儀或分光光度計比色,用軟件(oringe)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,的出公式,按公式將樣品帶入公式,
用于ELISA結(jié)果計算zui方便的是logit曲線。曲線的橫坐標(biāo)用標(biāo)樣各濃度(ng/ml 或其他單位)的自然對數(shù)表示,縱坐標(biāo)用各濃度顯色值的logit值表示。Logit值的計算方法如下:
B/B0 B
Logit(B/B0)=ln———— =ln————
1-B/B0 B0-B
其中B0是0ng/ml孔的顯色值,B是其它濃度的顯色值。
相關(guān)產(chǎn)品
上海勁馬實驗設(shè)備有限公司(huihuangzp.cn)主營:ELISA檢測試劑盒;免疫組化試劑盒,胎牛血清;酶聯(lián)免疫試劑盒,進(jìn)口抗體,生物試劑
地址:上海市松江區(qū)漕河涇研展路455號B座
版權(quán)所有 © 2024 上海勁馬實驗設(shè)備有限公司 備案號:滬ICP備15015681號 管理登陸 技術(shù)支持:環(huán)保在線 sitemap.xml