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13817140470更新時間:2013-12-16 瀏覽次數(shù):1371
基本知識
1. 液體培養(yǎng)基貯存于4 oC 冰箱,避免光照,實驗進(jìn)行前放在37度水槽中溫?zé)帷?nbsp;
2. 液體培養(yǎng)基(加血清) 存放期為六個月,期間glutamine 可能會分解,若細(xì)胞生長不佳,可以再添加適量glutamine。
配制參數(shù)
粉末培養(yǎng)基配制(以1 升為例):
1. 細(xì)胞培養(yǎng)基通常須添加10 % 血清,因此粉末培養(yǎng)基之配制體積為900 ml,pH 為 7.2 - 7.4。NaHCO3 為另外添加,若將NaHCO3 粉末直接加入液體培養(yǎng)基中會造成 pH 之誤差,或局部過堿。因此粉末培養(yǎng)基及NaHCO3 粉末應(yīng)分別溶解后才混合,然后用CO2 氣體調(diào)整pH,而非用強(qiáng)酸(HCl)或強(qiáng)堿(NaOH),因為氯離子對細(xì)胞生長可能有影響,且貯存時培養(yǎng)基的pH 易發(fā)生改變。
2. 材料:
2.1. 純水(milli-Q 水或二次至三次蒸餾水,水品質(zhì)非常重要)
2.2 粉末培養(yǎng)基
2.3 NaHCO3 (Sigma S-4019)
2.4 電磁攪拌器
2.5 無菌血清瓶
2.6. 0.1 或0.2 mm無菌過濾膜
2.7. pH meter
2.8. 真空幫浦
2.9. CO2 氣體
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